核酸提取与纯化
表面带有负电基团的磁性微球能够在不同的缓冲环境可逆地结合与释放核酸分子,因此经常用于自动化核酸提取试剂盒的开发。
MagneStar® MS500-SiOH和 MS500-COOH(核壳型结构,平均粒径 ~ 0.5 μm)两款磁珠经实验证明可用于从多种样本中提取DNA和RNA,样本种类包括全血、血浆、血清、鼻/咽拭子、细胞裂解液、福尔马林固定的组织、动植物切片等等。MS500-COOH型羧基氧化硅磁珠尤其适合用于新冠病毒RNA提取,可适配多种仪器及试剂体系。
应用案例——MagneStar®MS500-COOH磁珠用于COVID-19核酸提取
用检测试剂对提取后的病毒核酸进行荧光PCR定量检测,每个扩增实验重复三次,取Ct值的平均值,结果如下:
样本编号
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浓度 (copies/mL)
|
ORF1ab基因测值
|
N基因测值
|
A
|
10000
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27.47
|
25.01
|
B
|
1000
|
31.03
|
27.76
|
C
|
500
|
31.61
|
28.98
|
D
|
200
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32.35
|
29.09
|
扩增曲线见下图,A-D每组实验只展示了一次扩增的曲线(左图 ‒ ORF1ab基因,FAM通道;右图 ‒ N基因,ROX通道):
结论:MagneStar® MS500-COOH磁珠可以用于新冠病毒的提取,在病毒核酸浓度低至200 copies/mL时仍能有效检出。
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